歡迎來到人人文庫網! | 幫助中心 人人文檔renrendoc.com美如初戀!
人人文庫網
換一換
首頁 人人文庫網 > 資源分類 > PPT文檔下載
 

課件:厭氧菌基礎知識.ppt

  • 資源ID:21556861       資源大小:1.71MB        全文頁數:91頁
  • 資源格式: PPT        下載權限:游客/注冊會員    下載費用:35積分
驗證碼快捷下載 游客一鍵下載
會員登錄下載
三方登錄下載: 微信快捷登錄 支付寶快捷登錄   QQ登錄   微博登錄  
下載資源需要35積分
郵箱/手機:
驗證碼: 獲取驗證碼
溫馨提示:
支付成功后,系統會自動生成賬號(用戶名為郵箱或者手機號,密碼是驗證碼),方便下次登錄下載和查詢訂單;
支付方式: 支付寶    微信支付   
驗證碼:   換一換

 
友情提示
2、PDF文件下載后,可能會被瀏覽器默認打開,此種情況可以點擊瀏覽器菜單,保存網頁到桌面,既可以正常下載了。
3、本站不支持迅雷下載,請使用電腦自帶的IE瀏覽器,或者360瀏覽器、谷歌瀏覽器下載即可。
4、本站資源下載后的文檔和圖紙-無水印,預覽文檔經過壓縮,下載后原文更清晰   

課件:厭氧菌基礎知識.ppt

厭氧菌基礎知識,醫學檢驗科 夏建樸,2019,-,1,厭 氧 菌,第一節 概念、種類與分布 是指一大群在有氧條件下不能生長,必須在無氧條件下才能生長的細菌。主要可分為兩大類,一類是有芽胞的G梭菌,另一類是無芽胞的G及G-桿菌與球菌。,2019,-,2,無芽胞厭氧菌在臨床厭氧菌標本檢出率中約占90%,分布廣泛,多為條件致病菌;厭氧菌的感染遍及臨床各科,且多為混合感染;對氨基糖甙類抗生素耐藥,而對甲硝唑滅滴靈普遍敏感, 40多個菌屬,300多個菌種。有芽胞厭氧菌只有梭菌屬,共130個種。,2019,-,3,無芽胞厭氧菌同需氧菌與兼性厭氧菌共同構成機體的正常菌群,其中厭氧菌占有絕對優勢,例如腸道菌群占99.9%。正常情況下菌群之間保持著微生態平衡,厭氧菌代謝產生的乙酸、乳酸等能抑制病原菌生長。如長期使用廣譜抗生素、激素、免疫抑制劑等,在發生菌群失調或機體免疫力下降或細菌進人非正常寄居部位時,這些厭氧菌即可作為條件致病菌而導致內源性感染。,2019,-,4,一厭氧菌感染的條件,1.組織缺氧或氧化還原電勢Eh降低可造成厭氧菌生長的適宜環境,易于遭受厭氧菌感染。 2.機體免疫功能下降,如老年人、早產兒, 接受免疫抑制劑、抗代謝藥物、放射或化療治療的患者,其全身免疫功能受損或降低,厭氧菌感染率相當高。,2019,-,5,3.長期應用氨基糖甙類抗生素,或長期應用頭孢菌素、四環素等無效者,均可誘發厭氧菌感染。 4.需氧菌、兼性厭氧菌的混合感染。需氧菌生長耗竭了氧氣,有利于厭氧菌的生長。,2019,-,6,二厭氧菌感染臨床細菌學指征,1.感染局部產生氣體,組織腫脹和壞死。 2.粘膜附近的感染。 3.深部外傷的繼發感染,流產胃腸手術后發 生的感染。,2019,-,7,4.分泌物有惡臭,或為暗血紅色,并在紫外 光下發出紅色熒光。 5.分泌物涂片鏡檢有細菌,而常規培養陰性 者;或在培養基深部長的細菌。 6.長期應用氨基糖甙類抗生素治療無效病例。,2019,-,8,第二節厭氧性細菌的檢驗,一采集標本 不能被正常菌群污染;應盡量避免接觸空氣。最理想是能取得組織標本。 下列標本無送檢價值,不宜做厭氧菌培養①鼻咽拭子;②齒齦拭子;③痰和氣管抽取物;④胃和腸道內容物、肛拭;⑤接近皮膚和粘膜的分泌物;⑥褥瘡潰瘍及粘膜層表面;⑦排出的尿或導尿;⑧陰道或子宮拭子;⑨前列腺分泌物。 標本運送中應盡量避免接觸空氣。不要冷藏 。,2019,-,9,二直接涂片染色鏡檢,結合標本來源,性狀與氣味,可提供許多有用的信息,對估計標本中含菌量、細菌種類和選擇培養基等都有意義 。標本發臭,鏡檢發現細菌染色不均,形態奇特者常是厭氧菌的表現 。 如兩端鈍圓著色深,中間著色淺不均勻,且有空泡,長短不一的革蘭陰性桿菌常脆弱類桿菌。,2019,-,10,標本呈琥珀酸味,帶血性或用紫外燈照射發紅色熒光,涂片鏡檢為G-球桿菌,間或有長短不一的多形性,并有惡臭者,常為產黑色素普雷沃菌。 菌體細長,兩端尖, 為梭形的G-桿菌,有紫色顆粒沿菌體長軸排列,成雙排列尖端相對,并有丁酸臭味者,常是具核梭桿菌。 菌體高度多形性,長短不一,菌體中部腫脹或呈圓球者,可能是壞死梭桿菌 。,2019,-,11,極小的G-球菌,可能是韋榮球菌。 G無芽胞桿菌,呈乳酸氣味者,可能是乳酸桿菌。呈丙酸氣味者,并有特殊排列呈X、Y、或柵狀者可能是痤瘡丙酸桿菌。 有醋酸氣味的可能是雙歧桿菌。 菌體分枝,呈棒狀或柵狀排列,且發現黃色顆粒,有琥珀酸氣味者,多是放線菌。,2019,-,12,G芽胞桿菌,肯定是梭狀芽胞桿菌屬。 G短粗兩端鈍圓桿菌,無芽胞,中性粒細胞也很少且變形破碎,標本來自戰傷或肢體嚴重腫脹者,大多是產氣莢膜梭菌。 G桿菌,有芽胞,并有異丁酸或異戊酸等氣味,標本來自抗生素相關性腸炎者,大多是艱難梭菌。,2019,-,13,(三)厭氧菌培養基,1強化血瓊脂平板BAP 即布氏瓊脂或牛心、牛腦浸出液瓊脂為基礎培養基,補加酵母浸膏0.5%、動物血5%~10%、維生素k10.1μg/ml和氯化血紅素5μg/ml,是一種非選擇性培養基,幾乎能培養出所有的厭氧菌。,2019,-,14,2卡那萬古霉素凍溶血瓊脂平板KVLB 可抑制大多數兼性厭氧菌,使產黑色素普雷沃菌早期形成黑色素。只需23d出現黑色菌落。絕大多數類桿菌屬、普雷沃菌屬和紫單胞菌屬都生長良好,梭桿菌和厭氧球菌不能生長。是常用的選擇性培養基。卡那霉素含量為75100μg/ml,萬古霉素為75μg/ml。,2019,-,15,3七葉苷膽汁平板BBI本培養基含20%膽汁,1g/L七葉苷和100μg/ml的慶大霉素。抑制需氧菌,膽汁抑制對之敏感的厭氧菌。只有耐膽汁的脆弱類桿菌與可變梭桿菌和死亡梭桿菌不被抑制,反被刺激菌落較大,還能水解七葉苷,菌落周圍有棕黑色的暈。,,2019,-,16,4卵黃平板EYA和兔血平板用于選擇產氣莢膜梭菌,標本接種兔血平板,見有雙溶血環,內環是與菌落一樣大小的透明溶血,外環是寬的甲型溶血,放半小時后菌落變綠色或褐色,同時可接種卵黃平板,以進行卵磷脂酶試驗鑒定產氣莢膜梭菌。,2019,-,17,四厭氧菌培養常用方法,1厭氧罐培養法應用物理或化學方法造成無氧環境。如冷觸媒法利用氣體發生器產生氫及二氧化碳,產生的氫在觸媒作用下,與罐內的氧結合成水,將氧消耗掉,造成無氧環境。產生的二氧化碳約為10%,也適宜厭氧菌生長。方法為先將觸媒金屬鈀或鉑及美藍指示劑放入罐內,然后將已接種的平板置于罐內,將氣體發生袋的指定角剪開,加入lOml水,立即放入罐內,封閉厭氧罐即可。,2019,-,18,2氣袋法原理相同,只是將厭氧罐用無毒、透明的塑料袋代替。 3厭氧手套箱培養法厭氧手套箱公認的培養厭氧菌最佳儀器。它是密閉的大型金屬箱,前面有透明面板,板上裝兩個手套,可通過手套在箱內進行操作。適用于在無氧環境中連續進行標本接種、培養和鑒定等全部工作。,2019,-,19,六鑒定試驗,據厭氧菌的菌體形態、染色反應、菌落性狀以及對某些抗生素的敏感性等作出初步鑒定。最后鑒定則要進行生化反應及終末代謝產物等項檢查。 1.形態與染色 不僅能反映各種厭氧菌的特殊形態,同時也為鑒定厭氧菌提供參考依據。,2019,-,20,2.菌落性狀,不同厭氧菌其菌落形狀和性質不同。梭菌的菌落特點是形狀不規則,而無芽胞厭氧菌多呈單個的圓形小菌落。 1色素產黑色素普魯沃菌產生黑褐色或黑色色素。齲齒放線菌產生粉紅色色素。奈氏放線菌產生黃褐色色素,2019,-,21,2溶血產氣莢膜梭菌在新鮮血瓊脂平板形成雙溶血圈。 3熒光產黑色素普魯沃菌在紫外線燈下,顯示磚紅色熒光;梭桿菌常發生黃綠色熒光;艱難梭菌發生綠色熒光。,2019,-,22,3.耐氧試驗,當在厭氧平板上有菌生長時,為確定是否為厭氧菌,必須做耐氧試驗。 4.藥物鑒定試驗 用于鑒定厭氧菌的抗生素有卡那霉素和滅滴靈。卡那霉素的敏感性將梭桿菌屬與類桿菌屬區分開,大多數類桿菌對卡那霉素耐藥滅滴靈紙片在鑒別厭氧菌敏感與非厭氧菌不敏感有重要意義 。,2019,-,23,5.聚茴香腦磺酸鈉試驗,厭氧消化鏈球菌對50g/L的聚茴香腦磺酸鈉溶液敏感,而絕大多數其他G球菌耐藥。,2019,-,24,6.生化特性鑒定,主要包括多種糖類發酵試驗、吲哚試驗、硝酸鹽還原試驗、觸酶試驗、卵磷脂酶試驗、脂肪酶試驗、蛋白溶解試驗、明膠液化試驗及膽汁肉湯生長試驗和硫化氫試驗等。為簡化厭氧菌鑒定,有多種試驗鑒定系統,如推測性平皿系統等。雖然不完善,但可使厭氧菌的鑒定標準化,自動化。,2019,-,25,7.氣液相色譜技術GLC,應用GLC分析厭氧菌的終末代謝產物,因各種厭氧菌的代謝產物不同,故已成為鑒定厭氧菌及其分類的比較可靠的方法.可在數十分鐘至數小時即可作出診斷。,2019,-,26,8.PCR,如采用PCR方法檢測抗生素相關性腹瀉病人糞便中艱難梭菌的毒素基因陽性率高達82.8%,明顯高于厭氧培養法的檢出率19.2%,且與厭氧培養法的一致性為 100%。,2019,-,27,9.基因探針,如用地高辛標記脆弱類桿菌的基因探針,檢測標本中的脆弱類桿菌其敏感性為89%,特異性為91.7%,檢測靈敏度為10pgDNA,故其特異性強,敏感性和靈敏度均高,并具有快速簡便的優點。,2019,-,28,第三節 厭氧球菌,在臨床標本中檢出的厭氧菌大約有25% 為厭氧性球菌。其中G消化球菌和消化鏈球 菌屬以及G-韋榮球菌屬與臨床感染相關。,2019,-,29,、消化球菌屬,黑色消化球菌是消化球菌屬中惟一的菌種。通常寄居在人的體表和與外界相通的腔道中,是人體正常菌群。在臨床上可引起人體各部組織和器官的感染,常與其他細菌混合感染,如腹腔感染、肝膿腫等。,2019,-,30,微生物特性,菌體圓形,排列成雙、短鏈或成堆。生長緩慢,厭氧培養2~4d才形成黑色不溶血的小菌落,接觸空氣后顏色變淺,傳代后黑色消失,通過庖肉培養后又可產生黑色素。不發酵糖,觸酶陽性為其特點。對青霉素、紅霉素、氯霉素、潔霉素、四環素及滅滴靈敏感。DNA的GC為5051mol%。,2019,-,31,微生物檢驗,從感染部位采集標本,作直接涂片鏡檢和分離培養。接種血瓊脂平板,并同時接種含血清硫乙醇酸鹽培養基或庖肉培養基增菌培養,經厭氧培養2~4d后,觀察菌落形態,革蘭染色觀察菌體形態和排列作出初步報告。據生化反應、抗生素紙片敏感試驗以及氣液相色譜分析代謝產物作出最后報告。,2019,-,32,二、消化鏈球菌屬,分成厭氧消化鏈球菌、不解糖消化鏈球菌、吲哚消化鏈球菌、大消化鏈球菌、微小消化鏈球菌、普氏消化鏈球菌、產生消化鏈球菌、四聯消化鏈球菌與天芥菜春還原消化鏈球菌等9個菌種,其代表菌種為厭氧消化鏈球菌。主要依據是DNA的GC為27-45mol%。,2019,-,33,臨床意義,以厭氧消化鏈球菌最常見,產生消化鏈球菌則 很少見。消化鏈球菌可引起各部組織和器官感 染,又以混合感染為多見,如腹腔感染、肝膿 腫、外陰、陰道及盆腔感染、肺部和胸膜感染、 口腔感染、顱內感染以及皮膚和軟組織感染等。,2019,-,34,厭氧消化鏈球菌可與金黃色葡萄球菌或溶血性 鏈球菌協同引起嚴重的創傷感染,即厭氧鏈球 菌肌炎。該菌常可引起細菌性心內膜炎,主要 由原發病灶口腔、牙周和尿道感染而引起。致 菌血癥較少見。 在臨床標本分離株中,本菌屬占20%35%, 為第2位,僅次于脆弱類桿菌。,2019,-,35,微生物特性,為G球形或卵圓形,成雙或呈短鏈狀排列。無鞭毛。在35℃-37℃pH7-7.5時生長佳。在厭氧血平板上,菌落1mm,灰白色凸起、不透明邊緣整齊,不溶血。在硫乙醇酸鈉液體培養基中,呈顆粒狀沉淀生長。吐溫-80促進生長。觸酶陰性,發酵葡萄糖不發酵乳糖,不水解膽汁七葉苷,吲哚、尿素酶、硝酸鹽還原試驗均為陰性,對多聚茴香磺酸鈉敏感。,2019,-,36,微生物檢驗,檢查方法與檢查黑色消化球菌基本相同。 本菌培養物常有惡臭氣味,為其特點。可通過 形態、染色、培養特性、生化反應發酵葡萄糖 產酸,分解甘露醇等與黑色消化球菌鑒別。,2019,-,37,三、韋榮球菌,韋榮球菌屬為革蘭陰性厭氧球菌,有7個種,其中小韋榮球菌和產堿韋榮球菌是常見的二個種 。 口腔、咽部、胃腸道和女性生殖道的正常菌群,致病力不強,為條件致病菌。本屬菌可產生內毒素,為脂多糖,有抗原性。,2019,-,38,臨床標本可采自軟組織膿腫和血液。大多見于混合感染。臨床分離率小于1%。 小韋榮球菌可引起上呼吸道感染,而產堿韋榮球菌多見于腸道感染。,2019,-,39,微生物特性,韋榮球菌形態相似,為G-球菌,排列成對或短鏈,近似奈瑟球菌。無鞭毛和芽胞。 專性厭氧,在血瓊脂平板上發育良好,培養48h后,形成1~2mm圓形、凸起灰白色至黃色混濁菌落,不溶血。生化反應不活潑,不分解糖類,還原硝酸鹽,觸酶反應-/。 小韋榮球菌觸酶試驗陰性,而產堿韋榮球菌為陽性。,2019,-,40,微生物檢驗,取臨床標本作直接涂片、革蘭染色、鏡檢。如發現G-小球菌、成對或短鏈或不規則排列,疑為本菌屬。可用厭氧血瓊脂平板分離培養,2~3d觀察結果,同時可接種硫乙醇酸鹽肉湯或庖肉培養基,觀察生長情況與形態,并做生化反應進行鑒定。,2019,-,41,第四節G-無芽胞厭氧桿菌,是一群不形成芽胞的厭氧桿菌,種類較多,包括類桿菌屬、普雷沃菌屬、紫單胞菌屬和梭桿鹵屬等。是正常菌群,可作為條件致病菌引起內源性感染。,2019,-,42,一、類桿菌屬,是最重要的G-無芽胞厭氧桿菌,其中以脆弱類桿菌最常見,是本屬代表菌株,其DNA的GC為39-48mol%。,2019,-,43,臨床意義,類桿菌常寄生于口腔、腸道和女性生殖道,其中脆弱類桿菌占臨床分離株的25%,占類桿菌分離株的50%,居臨床厭氧菌分離株首位。腸道的重要菌群,為大腸埃希菌的100~1000倍。 脆弱類桿菌能產生一種鋅依賴金屬蛋白酶或腸毒素,能使腸粘膜細胞產生病理效應。可引起女性生殖系統、胸腔及顱內感染。,2019,-,44,微生物特性,G-著色不均,培養物涂片呈明顯多形性,無鞭毛、無芽胞,多數有莢膜。 專性厭氧,在厭氧血平板經2448h培養后,菌落圓形,表面光滑,邊緣整齊,不溶血,加入氯化血紅素、維生素K和20%膽汁可促進生長。在膽汁七葉苷BBE培養基中生長旺盛,菌落較大,能分解膽汁七葉苷,使培養基變黑色,菌落周圍有黑暈,故BBE可作為脆弱類桿菌的選擇鑒別培養基。,2019,-,45,觸酶試驗陽性,發酵葡萄糖、麥芽糖和蔗糖,不發酵阿拉伯糖、鼠李糖、山梨醇和海藻糖,水解膽汁七葉苷,耐20%膽汁,并生長旺盛。發酵代謝產物是乙酸、丙酸和琥珀酸,一般不產生丁酸大部分菌株對青霉素G、卡那霉素和新霉素耐藥,但95%以上對氯霉素、氨芐青霉素、氧哌嗪青霉素、羧塞吩青霉素、亞胺硫霉素、甲硝唑等敏感。,2019,-,46,微生物檢驗,標本發現G-桿菌,染色不均,具有多形性,可疑為本菌,用BBE平板分離培養37℃厭氧培養2448h觀察菌落特征。膽鹽可促進生長。 根據發酵葡萄糖、麥芽糖和蔗糖,水解七葉苷,耐20%膽汁等生化試驗作出鑒定。 氣液相色譜檢查其終末代謝產物,則有助于快速診斷。同時應注意與其他耐膽鹽的類桿菌相鑒別。,2019,-,47,二、普雷沃菌屬,代表菌種是產黑色素普雷沃菌。 寄生在口腔、女性生殖道等部位的正常菌群,僅次于脆弱類桿菌。是一種常見的條件致病菌,可引起內源性感染和混合感染,女性生殖道及口腔感染較為多見。 其致病物質可能是膠原酶,與結締組織的分解有關。,2019,-,48,微生物特性,本群細菌的形態大同小異,涂片檢查為G-球桿狀,成雙或短鏈,兩端鈍圓,有濃染和空泡。呈多形性。無鞭毛、芽胞和莢膜、 為專性厭氧菌。在厭氧平板上生長良好,經2~3d培養后,菌落為圓形凸起、呈β-溶血。菌落初形成時為灰白色, 5~7d轉為黑色。生長時需氯化血紅素和維生素K,故在培養基中加入這兩種物質可促進生長。,2019,-,49,在20膽汁培養基中絕大多數不生長,觸酶陰性,除中間普雷沃菌、變黑普雷沃菌和部分洛氏普雷沃菌外脂酶均為陰性,脲酶陰性。多數對氨基青霉素、頭孢菌素、卡那霉素和萬古霉素耐藥,而對甲硝唑霉素、利福平和新霉素敏感。,2019,-,50,三、紫單胞菌屬,與人類有關的有不解糖紫單胞菌、牙髓紫單 胞菌和牙齦紫單胞菌等3種。代表菌種是不解 糖紫單胞菌。其DNA的GC為45-54mol%。,2019,-,51,主要分布于人類口腔、泌尿生殖道和腸道,在正常人體的檢出率低。動物源性紫單胞菌在被動物咬傷感染的人體中檢出,這些菌株與人源紫單胞菌相似,但基因型不同。主要引起人類牙周炎、牙髓炎、根尖周炎、也可引起肺胸膜炎、闌尾炎和細菌性陰道炎,尚可引起頭、頸和下呼吸道感染。,2019,-,52,三微生物特性1,G-桿菌或球桿菌,兩端鈍圓,著色不均勻。維生素K和氯化血紅素可促進本菌生長及黑色素的產生,凍溶血較非凍溶血更有利于早期產生黑色素。在厭氧血瓊脂平板上,35℃~37℃厭氧培養3-5d,形成1-2mm圓形凸起、邊緣整齊、棕色或黑色菌落。用紫外線燈照射可出現紅色熒光。,2019,-,53,三微生物特性2,產生色素,不分解或弱分解糖。觸酶試驗多陰性,膽汁七葉苷和脂酶試驗陰性,吲哚多陽性。能液化明膠。代謝產物為乙酸、丙酸和異戊酸等。對卡那霉素、多粘菌素耐藥,對萬古霉素、頭孢菌素、氯霉素、氯林可霉素、羥氨芐青霉素等均敏感。,2019,-,54,(四)微生物檢驗,1.標本采集 根據病變部位采取適當標本厭氧 送檢 2.本菌特征 G-桿菌或球桿菌,著色不均,在 厭氧血瓊脂平板上形成的棕色菌落,用紫外 線照射可出現紅色熒光。,2019,-,55,(四)微生物檢驗,3.與產黑色素普魯沃菌相簽別,產黑色素普魯 沃菌可發酵葡萄糖、乳糖和蔗糖,而紫單胞 菌均不發酵糖。 4.與其他紫單胞菌相鑒別,不解糖紫單胞菌觸 酶試驗陰性,巖藻糖苷酶試驗陽性;牙髓紫 單胞菌和牙齦紫單胞菌。巖藻糖苷酶試驗均 為陰性,觸酶試驗陽性。,2019,-,56,四、梭桿菌屬,是臨床常見的G-無芽胞厭氧菌,因其兩端尖細如梭,故名梭桿菌。是人口腔、上呼吸道、腸道及泌尿生殖道的正常菌群,以牙縫中最為多見。在臨床標本中,常見的有具核梭桿菌、壞死梭桿菌、死亡梭桿菌和潰瘍梭桿菌等16種。其代表菌種為具核梭桿菌。DNA的GC含量為26-34mol%。,2019,-,57,一臨床意義,具核梭桿菌最常見,在口腔、生殖器、胃腸道和上呼吸道中被發現。 壞死梭桿菌是毒力很強的梭桿菌,可在兒童和青年人中引起扁桃體炎,有時并發單核細胞增多癥,它是青年人扁桃體周圍膿腫中最常分離到的厭氧菌。尚可引起膿胸和菌血癥。,2019,-,58,二微生物特性,1.形態與染色 為典型的G-梭形桿菌,無鞭毛 不能運動。 2.培養特點 專性厭氧菌,在血平板上生長良 好。經48h培養后,菌落直徑 l2mm,不規 則圓形略凸起,灰色發光透明,常顯示珍珠 光斑點,通常不溶血。 3. 不發酵任何糖類,吲哚和DNA酶試驗陽性, 觸酶陰性。不還原硝酸鹽,在20%膽汁中不 生長,脂酶試驗陰性。主要代謝產物是丁酸。,2019,-,59,三微生物檢驗,1.標本采集 化膿感染者取膿汁,敗血癥 取血液并先增菌培養。 2.本菌特征 革蘭陰性梭桿菌,兩端尖細, 中間膨大、似梭狀絕大部分菌株在20% 膽汁中不生長,不發酵葡萄糖,甘露醇, 不分解膽汁七葉苷,吲哚和DNA酶試驗陽 性。,2019,-,60,第五節 G無芽胞厭氧桿菌,在厭氧菌中約占15%。常見的有丙酸桿菌屬、優桿菌屬、乳酸桿菌屬、雙歧桿菌屬等四個屬。,2019,-,61,一、丙酸桿菌屬,主要寄居于人皮膚皮脂腺、腸道以及乳制品中。臨床有關的痤瘡丙酸桿菌。 痤瘡丙酸桿菌。是血液、腰穿及骨髓穿刺液培養時常見的污染菌。在植入修復物或器械引起的感染中也有重要作用,對心瓣膜損傷者可引起心內膜炎。與痤瘡和酒渣鼻有關。,2019,-,62,本菌特征 革蘭陽性厭氧棒狀桿菌,數次在厭氧環境下傳代后可變為兼性厭氧菌,吐溫-80可刺激其生長,大都能液化明膠,觸酶試驗陽性,發酵葡萄糖產生丙酸。,2019,-,63,二、優桿菌,1.是人口腔與腸道正常菌群的組成成員,對機 體有營養、生物拮抗和維持腸道微生態學平 衡等功能。可造成混合感染,引起人體心內 膜炎等疾病。 2.優桿菌呈多形性,20%膽汁可促進生長,按 生化反應不同可分為水解糖優桿菌和不水解 糖優桿菌兩大群,粘液優桿菌則可發酵葡萄 糖,遲鈍優桿菌不發酵糖類。,2019,-,64,三、雙歧桿菌,1.是重要生理菌群。大腸中可達108~1012/g糞便,維持微生態平衡。能合成維生素,提高免疫力,抗腫瘤,起到營養保健作用。用于藥品和食品的有青春雙歧桿菌、嬰兒雙歧桿菌、兩歧雙歧桿菌、長雙歧桿菌和短雙歧桿菌。,2019,-,65,2.本菌有高度多形性,著色不均;菌落較小,圓形不透明;觸酶試驗陰性,發酵葡萄糖和乳糖。 3.抵抗力弱,對桿菌肽、青霉素、紅霉素、氯林可霉素等高度敏感。,2019,-,66,四、乳桿菌,1.是消化道、陰道的正常共生菌,能分解陰道中的多種糖類而使陰道呈酸性,以抑制某些致病菌的生長。 2.乳桿菌與齲齒的形成有密切的關系 .口腔的變異鏈球菌與消化鏈球菌使蔗糖變成葡聚糖,附于牙面形成齒斑。乳桿菌能溶解牙釉使之脫鈣造成齲齒。,2019,-,67,3. G細長桿菌,菌落較小邊緣不整齊;觸酶、硝酸鹽還原和吲哚等試驗均陰性;發酵葡萄糖、乳糖、麥芽糖和蔗糖產生乳酸 。,2019,-,68,第六節梭狀芽胞桿菌屬,G,芽胞正圓形,直徑大于菌體,位于菌體中央,極端或次極端,使菌體膨大呈梭狀,故名梭菌屬。 GC值為2254mol%,代表菌為酪酸梭菌。 在自然界分布廣泛,多數為腐物寄生菌,有致病性主要有破傷風梭菌、產氣莢膜梭菌、肉毒梭菌與艱難梭菌。 引起人類疾病主要有破傷風、氣性壞疽、食物中毒和假膜性結腸炎等。,2019,-,69,一、破傷風梭菌,存在于自然界,在土壤和人與動物的腸道中都有存在。 當機體受創傷時或新生兒接生時使用不潔用具斷臍帶,破傷風梭菌可侵入傷口生長繁殖,分泌外毒素,引起機體強直性痙攣、抽搐,稱為破傷風。 全世界每年約有100萬病例發生,死亡率在20%左右。,2019,-,70,(1)致病因素,外毒素稱為痙攣毒素。為蛋白質,不耐熱,可被蛋白消化酶破壞,加0.3%甲醛于毒素中37℃培養4周可轉變為類毒素。 對中樞神經系統有親和力,尤其是運動神經細胞,能與神經節苷脂結合。封閉了脊髓抑制性觸突,阻止釋放抑制性沖動介質,而破壞了正常的抑制性調節功能,從而發生肌肉痙攣性收縮 。,2019,-,71,2臨床意義,破傷風梭菌通過創傷感染,局部組織氧化還原電勢降低。細菌繁殖且產生毒素。細菌不進入血流,引起嚴重毒血癥,主要癥狀為骨骼肌痙攣。出現張口困難,牙關緊閉呈苦笑面容。肌肉發生強直性痙攣,呈角弓反張,呼吸困難,可因窒息死亡。引起的疾病叫破傷風 。,2019,-,72,3微生物特性,1.形態與染色 G細長。有周鞭毛,無莢晚,芽胞正圓形,比菌體大,位于菌體頂端,使細菌呈鼓槌狀。厭氧培養,細菌呈薄膜狀擴散生長。 2.不發酵糖類,能液化明膠。產生H2S,形成吲哚,不還原硝酸鹽,對蛋白質有微弱的消化作用。 3.根據鞭毛抗原不同,可分10個血清型。產生毒素的生物活性相同,可被任何型抗毒素中和。,2019,-,73,(4)抵抗力,芽胞甚強,在土壤中數年不死,煮沸100℃ 1h可被殺滅,能耐干熱150℃1h,50g/L的石炭酸1015h。 對青霉素、紅霉素、四環素敏感,磺胺類有抑制作用,對氨基糖苷抗生素耐藥。,2019,-,74,5微生物檢驗,根據臨床即可診斷,一般不作細菌學檢查。 1.直接涂片 從病灶處取膿汁或壞死組織,直接涂片革蘭染色,鏡檢觀察菌體見一端有圓形芽胞呈鼓槌狀的桿菌的形態,可初步報告結果。 2.厭氧培養 本菌較易分離。將可疑的材料接種庖肉培養基,在85℃水浴加熱30min,殺滅雜菌,而芽胞得以存活,35℃-37℃培養2-4d。轉種適宜的培養基,如新鮮血平板。厭氧培養18-24h,細菌呈薄膜狀擴散生長。,2019,-,75,二、產氣莢膜梭菌,產氣莢膜梭菌是氣性壞疽的主要病原菌。 本菌可產生外毒素及多種侵襲性酶類,有12種。 這些毒素和酶與組織溶解、壞死、產氣、水腫以及病變的迅速擴散蔓延和全身中毒癥狀均有密切關系。 此外,有些菌株還能產生腸毒素和溶血毒素、腸毒素能改變腸壁通透性,促使體液滲入腸腔,引起腹瀉。,2019,-,76,α毒素,為卵磷脂酶,能分解人和動物細胞膜上磷脂和蛋白質的復合物,破壞細胞膜,引起溶血、組織壞死和血管內皮損傷,使血管通透性增高,造成水腫。還能促使血小板凝聚,導致血栓形成,局部組織缺血。 β毒素引起人類壞死性腸炎。 ε毒素有壞死和致死作用。,2019,-,77,θ毒素有溶血和破壞白細胞作用,對心肌有毒性。 κ毒素膠原酶能分解肌肉和皮下的膠原組織,使組織溶解。 μ毒素透明質酸酶能分解細胞間質中透明質酸 γ毒素DNA酶能使細胞核DNA解聚,降低壞死組織的粘稠度。,2019,-,78,三微生物特性,1.為革蘭陽性粗短大桿菌,兩端鈍圓,芽胞橢圓形,位于菌體中央或次極端,在無糖培養基中有利于形成芽胞。在機體內可產生莢膜 無鞭毛,不能運動。,2019,-,79,2.培養特征,厭氧,繁殖迅速,培養2h后,在液體培養基深層即有明顯生長;4-6h孵育后出現表面生長。在固體培養基上,經24h培養,菌落直徑2-4mm,圓形凸起光滑、邊緣整齊、無遷徙生長現象。在血平板上有溶血環,在蛋黃瓊脂甲板上,菌落周圍出現乳白色混濁圈。在庖肉培養基中產生氣體,在牛乳培養基能分解乳糖產酸,使酪蛋白凝固,同時產生大量氣體,將凝固的酪蛋白沖成蜂窩狀,并將液面的凡土林層向上推擠,甚至沖開管口棉塞,氣勢兇猛,稱為“洶涌發酵”,是此菌的特征。,2019,-,80,3.生化反應,所有型菌株均能發酵葡萄糖、麥芽糖、乳糖和蔗糖,產酸產氣不發酵甘露醇或水楊苷;液化明膠,產生H2S,不能消化已凝固的蛋白質和血清,吲哚陰性。主要代謝產物為乙酸和丁酸,有時也形成丁醇。,2019,-,81,四微生物檢驗,1.標本的采集 一般采取創傷深部的分泌物、 穿刺物、壞死組織塊、血液、可疑食物。 2.標本直接檢查 可見到G粗大桿菌,并有雜 菌,鏡下白細胞較少形態不規則,是其特點, 對早期診斷具有定意義。不一定見到莢膜 和芽胞。,2019,-,82,3.分離培養本菌對低濃度氧有耐性,生長 迅速,故容易分離。在庖肉培養基中培 養8~lOh后,轉種于血平板。在厭氧環 境培養18h,即可挑取菌落進行鑒定。在 組織中一般不成芽胞。故病理材料不需 加熱處理。因為加熱處理能殺死繁殖體。,2019,-,83,4.鑒定,1形態特征和缺少芽胞,有莢膜特征。 2菌落特征和糖發酵反應,特別是“洶涌發酵”現象。 3Nagler試驗 卵磷脂酶具有抗原性,活性可被抗血清所抑制。測定時在乳糖卵黃牛乳瓊脂平板的半側涂以產氣莢膜梭菌與A型諾維梭菌混合抗毒素,爾后從未涂抗毒素的側向涂抗毒素一側接種待測菌,厭氧培養18h后觀察,未涂抗毒素一側菌落周圍出現混濁的白環,而在涂抗毒素一側生長的菌落無此現象,為Nagler試驗陽性。,2019,-,84,三、肉毒梭菌,分8個毒素型,其中A、B、E、F型對人致病,A、D型最常見。 廣泛存在于自然界,在厭氧條件下產生毒性極強的肉毒毒素。作用于神經肌肉接頭處和植物神經末梢,阻止釋放乙酰膽堿,導致肌肉麻痹。重者可死于呼吸困難與心力衰竭。 引起食物中毒的食品,國外以罐頭等制品為主,國內以發酵豆制品為主占80%以上。,2019,-,85,三微生物特性,1.形態與染色 G粗短桿菌,單獨或成雙排 2.培養特性 嚴格厭氧,在卵黃平板上,菌 落周圍出現渾濁圈。能消化肉渣,使之變 黑;腐敗惡臭。 3.生化反應 本菌的特征是發酵蔗糖,不發 酵乳糖。各型均液化明膠,產生H2S,但 不產生吲哚。,2019,-,86,4.毒素分為8個型,國內報告的大多是A型。 只能被同型抗毒素中和。但藥理作用相 同。 5.抵抗力 本菌芽胞抵抗力很強,可耐熱 100℃1h以上。,2019,-,87,四微生物檢驗,肉毒梭菌引起的食物中毒,其診斷主要通 過檢出毒素,因肉毒梭菌本身并不致病查 毒素的同時作細菌分離培養,并檢測分離 細菌產生毒素的能力和性質。,2019,-,88,后面內容直接刪除就行 資料可以編輯修改使用 資料可以編輯修改使用 資料僅供參考,實際情況實際分析,,感謝您的觀看和下載,The user can demonstrate on a projector or computer, or print the presentation and make it into a film to be used in a wider field,四、艱難梭菌,艱難梭菌是專性厭氧菌,對氧敏感,很難分離培養。腸道正常菌群。可被藥物選擇后大量繁殖而致病。此菌產生A毒素為腸毒素,B毒素為細胞毒素,能直接損傷腸壁細胞,造成假膜性結腸炎。尚可引起腎盂腎炎、腦膜炎、腹腔及陰道感染、菌血癥和氣性壞疽等。已成為醫院內感染的病原菌,被人們所重視。,2019,-,91,

注意事項

本文(課件:厭氧菌基礎知識.ppt)為本站會員(優質資料鋪)主動上傳,人人文庫網僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理,對上載內容本身不做任何修改或編輯。 若此文所含內容侵犯了您的版權或隱私,請立即通知人人文庫網(發送郵件至[email protected]或直接QQ聯系客服),我們立即給予刪除!

溫馨提示:如果因為網速或其他原因下載失敗請重新下載,重復下載不扣分。




關于我們 - 網站聲明 - 網站地圖 - 資源地圖 - 友情鏈接 - 網站客服 - 聯系我們

網站客服QQ:2846424093    人人文檔上傳用戶QQ群:460291265   

[email protected] 2020-2023  renrendoc.com 人人文庫版權所有  

備案號:蘇ICP備12009002號-5  經營許可證:蘇B2-20200052  蘇公網安備:32050602011097號





收起
展開
波叔一波中特万料堂